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微生物肥料中苏云金芽孢杆菌洗脱条件的优化

微生物肥料中苏云金芽孢杆菌洗脱条件的优化

 

樊川1,安琦1,曹亚彬1,李艳波2,杨瑶2

1.黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨1500102.哈尔滨学院,哈尔滨150000

 

摘要:本研究以苏云金芽孢杆菌作为供试液,分别以草炭、褐炭、鸡粪作为载体,通过改变pH、时间、温度、离子强度、缓冲液等环境条件,分别测出苏云金芽孢杆菌的解析率,确定出最佳解析条件,从而提高菌体洗脱率和回收率。

 

关键词:苏云金芽孢杆菌;肥料;洗脱条件;优化

 

        测定微生物肥料中的有效活菌数的方法起源于经典的微生物计数方法——平板计数法。在实际工作中,对固体样品的检测一直存在回收率低的问题,不能准确反映固体样品中真实有效菌数量,具体表现为:发酵液体菌剂在加入固体载体后,立即依据标准方法进行检测,测定出的有效活菌数总数,但也低于加入的发酵液体中总数1~2个数量级,严重偏离理论结果。这种现象的产生,其本质原因是微生物菌体与吸附载体之间的吸附作用,导致样品中菌体在洗脱阶段没有被充分洗脱[1]。如何减少微生物与载体间的吸附作用,提高菌体洗脱率和回收率成为急需解决的关键环节。本项目以苏云金芽孢杆菌作为供试菌,分别以草炭、褐炭、鸡粪为载体,通过改变pH、震荡时间、温度、离子强度、缓冲液等环境条件,确定出最佳吸附条件,从而为提高菌体洗脱率和回收率,为苏云金芽孢杆菌的更好应用奠定实验基础。

 

结论

 

        云金芽孢杆菌在溶液pH=8,震荡培养40min,培养温度40℃解吸率最高;且该菌的解吸率随Na+浓度增加解吸率逐渐降低;在不同缓冲液中的解析率不同,在表面活性剂中的解吸率最高,其次为磷酸盐缓冲液,再次为灭菌水;该菌在不同吸附载体中的解析率不同,在鸡粪中的解吸率高于褐煤的解吸率,褐煤高于草炭的解吸。本研究为进一步提高苏云金芽孢杆菌的洗脱率和回收率,更好应用该菌奠定了实验基础。

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