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姚赛栋

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橙皮素单葡萄糖苷的酶法生物合成与定向调控

采用高效液相色谱法(HPLC)测定橙皮苷酶的酶学性质,并探讨其催化橙皮苷转化为橙皮素单葡萄糖苷(hesperetin-7-O-glucoside, HMG)的反应历程与定向调控。结果表明:橙皮苷酶在20~70 ℃、pH 3.0~7.0具有较好的稳定性,且最适反应温度为60 ℃,最适反应pH值为4.0;在最适反应温度和pH下,该酶的动力学常数Km为296.69 μg/mL,最大反应速率Vm为0.872 3 μg/(mL·min);与HMG转化相关的关键酶α-L-鼠李糖苷酶的Km为232.58 μg/mL,Vm为0.397 9 μg/(mL·min);在60 ℃、pH 4.0,酶用量为15.35 U、增溶剂添加量为0.8%、葡萄糖添加量为3 mg/mL、酶解时间为3 h时,酶反应向有利于HMG转化的方向进行,此时HMG得率为35.8%。

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